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淺述mRNA微流控制備儀的具體操作流程

更新時(shí)間:2025-01-16  |  點(diǎn)擊率:650
  mRNA微流控制備儀儀器操作流程介紹:
  1.準(zhǔn)備工作
  設(shè)備與材料準(zhǔn)備:確保微流控制備儀及其配套設(shè)備(如注射泵、壓力控制器等)正常工作,準(zhǔn)備好所需的試劑和樣品,包括脂質(zhì)溶液、mRNA 溶液、緩沖液等。
  芯片安裝:根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選擇合適的微流控芯片,并正確安裝在制備儀上。注意芯片的方向和位置,確保其與儀器連接緊密且無(wú)泄漏。
  2.系統(tǒng)設(shè)置
  參數(shù)設(shè)定:在儀器的操作界面上設(shè)定所需的參數(shù),如流速、壓力、混合時(shí)間等。這些參數(shù)應(yīng)根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需求和樣品特性進(jìn)行調(diào)整,以確保最佳的制備效果。
  清洗與校準(zhǔn):使用適當(dāng)?shù)娜軇?duì)微流控系統(tǒng)進(jìn)行清洗,去除殘留的雜質(zhì)和氣泡。然后進(jìn)行校準(zhǔn)操作,確保儀器的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。
  3.樣品制備
  試劑配制:按照實(shí)驗(yàn)配方準(zhǔn)確配制脂質(zhì)溶液和 mRNA 溶液。脂質(zhì)溶液通常由多種脂質(zhì)成分溶解在有機(jī)溶劑中制成,而 mRNA 溶液則需要將純化的 mRNA 溶解在緩沖液中。
  過(guò)濾處理:將配制好的脂質(zhì)溶液和 mRNA 溶液通過(guò) 0.22 微米或更小孔徑的濾膜進(jìn)行過(guò)濾,以去除可能存在的顆粒雜質(zhì),防止堵塞微流控芯片的通道。
  4.mRNA微流控混合
  進(jìn)樣:將過(guò)濾后的脂質(zhì)溶液和 mRNA 溶液分別吸入相應(yīng)的注射器中,并將注射器安裝在注射泵上。然后,將注射器的出口與微流控芯片的入口連接,確保連接牢固且無(wú)泄漏。
  啟動(dòng)混合:?jiǎn)?dòng)注射泵,按照設(shè)定的流速將脂質(zhì)溶液和 mRNA 溶液同時(shí)注入微流控芯片中。在芯片的微通道內(nèi),兩種溶液會(huì)在精確控制的流速下快速混合,形成脂質(zhì)納米顆粒包裹的 mRNA。
  收集產(chǎn)物:從微流控芯片的出口收集制備得到的 mRNA-LNP 溶液,可根據(jù)需要進(jìn)一步進(jìn)行處理和分析,如粒徑檢測(cè)、包封率測(cè)定等。
  5.后處理與分析
  產(chǎn)物處理:對(duì)收集到的 mRNA-LNP 溶液進(jìn)行必要的后處理,如透析、超濾等,以去除未反應(yīng)的試劑和副產(chǎn)物,提高產(chǎn)物的純度和質(zhì)量。
  質(zhì)量檢測(cè):使用動(dòng)態(tài)光散射儀、透射電子顯微鏡等儀器設(shè)備對(duì)制備得到的 mRNA-LNP 進(jìn)行粒徑分布、形態(tài)結(jié)構(gòu)等質(zhì)量檢測(cè),確保其符合預(yù)期的要求。
  數(shù)據(jù)記錄與分析:記錄實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的各項(xiàng)參數(shù)和數(shù)據(jù),如流速、壓力、溫度等,以及產(chǎn)物的質(zhì)量檢測(cè)結(jié)果。對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和總結(jié),評(píng)估實(shí)驗(yàn)效果,為后續(xù)的實(shí)驗(yàn)優(yōu)化提供依據(jù)。

 

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